RevertAid™ First Strand cDNA Synthesis Kit
Opis
Sprawdź także LS63 FastGene Scriptase II cDNA Kit
***********************************************************
- Synteza pierwszej nici cDNA o długości do 13 kpz
- Zwiększona temperatura reakcji w zakresie 42-50°C
- Zestaw zawiera inhibitor RNaz RiboLock™ RNase Inhibitor
- Kompletny- zestaw zawiera – oligo(dT)18 oraz heksamery
Zastosowanie:
- Synteza pierwszej nici cDNA, dedykowany do zastosowania w reakcji RT-PCR and real-time RT-PCR
- Konstrukcja bibliotek cDNA
- Tworzenie sond do hybrydyzacji
- Analiza RNA.
Zestaw bazuje na odwrotnej transkryptazie RevertAid™, która wykazuje niższą aktywność Rnazy H w porównaniu z AMV odwrotną transkryptazą.
Rekombinowany inhibitor RNaz RiboLock™ RNase Inhibitor efektywnie chroni matrycę RNA przed degradacją, pozostając aktywny w warunkach reakcji odwrotnej transkrypcji w temperaturze do 55°C.
Skład zestawu
RevertAid ™ M-MuLV Reverse Transcriptase (200 u*/µl) |
120 µl
|
RiboLock ™ RNase Inhibitor (20 u**/µl) |
120 µl
|
5X Reaction Buffer 250 mM Tris-HCl (pH 8.3), 250 mM KCl, 20 mM MgCl2 , 50 mM DTT |
500 µl
|
10mM dNTP Mix |
250 µl |
Oligo(dT)18 Primer 100 µM, 0.5 µg/µl (15 A260 u/ml) |
120 µl |
Random Hexamer Primer 100 µM, 0.2 µg/µl (6 A260 u/ml) |
120 µl |
Forward GAPDH Primer, 10 µM 5’ – CAAGGTCATCCATGACAACTTTG – 3’ |
20 µl
|
Reverse GAPDH Primer, 10 µM 5’ – GTCCACCACCCTGTTGCTGTAG - 3’ |
20 µl
|
Control GAPDH RNA 1.3 kb 3’-poly(A) tailed RNA transcript, 0.05 µg/µl |
20 µl |
Water, nuclease-free |
2x1.25 ml |
Porównanie właściwości odwrotnych transkryptaz dostępnych w firmie (Thermo Scientific) Fermentas
Odwrotna transkryptaza |
Optymalna temp. reakcji |
Aktywna do temp. |
Długość odczytu |
Aktywność RNase H |
Inaktywacja |
Units/20 µl reakcji |
Czułość (RNA całkowite) |
Maxima H Minus Reverse Transcriptase | 50-55°C | 65°C | 20 kb | - | 85°C, 5 min | 200 u | 1pg |
Maxima™ Reverse Transcriptase |
50-55°C |
65°C |
20 kb |
+ |
85°C, 5 min |
200 u |
1 pg |
RevertAid™ Premium Reverse Transcriptase |
50-55°C |
60°C |
20 kb |
– |
85°C, 5 min |
200 u |
1 pg |
RevertAid™ H Minus Reverse Transcriptase |
42-45°C |
55°C |
13 kb |
– |
70°C, 10 min |
200 u |
0.1 ng |
RevertAid™ Reverse Transcriptase |
42°C |
50°C |
13 kb |
+ |
70°C, 10 min |
200 u |
0.1 ng |
M-MuLV Reverse Transcriptase | 37°C | 45°C | 9 kb | + | 70°C, 10 min | 40 u | 100 ng |
Dane techniczne
Opakowanie | 100 react. |