Phusion® Hot Start II High-Fidelity DNA Polymerase

Zobacz również: 

#LS36 FastGene HiFi HS 2x Master Mix

• Wysoce wierna polimeraza - 100X wyższa wierność od Taq
  
• Doskonała wydajność w trudnych warunkach
• Idealna do długich (17.5 kb!) i trudnych matryc bogatych w GC
• Idealna do mulitplex-PCR, sekwencjonowania, klonowania oraz innych aplikacji wymagających wysokiej dokładności

********************************************************************************

Wysoce wierna polimeraza Hot Start

Phusion® Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase jest najdokładniejszą polimerazą hot start dostępną na rynku. Dzięki ulepszonej formule stworzono polimerazę, która pozwala na wykorzystanie jeszcze szerszego zakresu starterów, włączając także te o niskich temperaturach topnienia.

Nowa Phusion® Hot Start II High Fidelity DNA Polymerase jest idealna do zastosowania w różnych technikach PCR, zarówno rutynowych jak i tych bardziej wymagających takich jak przy klonowaniu oraz high throuhgput PCR. Tak jak wszystkie polimerazy z grupy Phusion, Phusion® Hot Start II High Fidelity DNA Polymerase zawiera unikalną domenę przyłączającą się do dsDNA, czyniąc ją wyjątkowo szybką, dokładną i wytrzymałą.

 Zalety

• Brak ograniczeń temperaturowych przyłączania starterów.
• Możliwość przygotowywania reakcji w temperaturze pokojowej.
• Dzięki unikalnej technologii reaktywacja nie wymaga czasu.
• Szybki PCR z wyjątkową wiernością (ponad 6-krotnie dokładniejsza od polimerazy Pfu)
• Duża ilość produktu przy małej ilości polimerazy zapewnia doskonałą cenę na reakcję.
• Wytrzymały enzym z wysoką tolerancją na inhibitory, dzięki czemu wymaga minimalnej optymalizacji.

W temperaturze pokojowej Phusion® Hot Start II High Fidelity DNA Polymerase aktywność polimerazy jest blokowana za pomocą odwracalnie związanej z nią molekuły Affibody®, co sprawia, że polimeraza jest wyjątkowo specyficzna. Modyfikacja hot start także zapobiega degradacji starterów podczas ustawiania reakcji. Unikalna technologia hot start zapewnia natychmiastową reaktywację w standardowych temperaturach cykli. Ulepszona molekuła Affibody® wykorzystana w Phusion® Hot Start II High Fidelity DNA Polymerase znosi wszelkie ograniczenia temperaturowe podczas przyłączania starterów. Dzięki temu udoskonaleniu możliwe jest użycie szerokiego spektrum starterów, włączające te o bardzo niskiej temperaturze topnienia.

Phusion® Hot Start II High Fidelity DNA Polymerase zapewnia najwyższą specyficzność oraz dużą ilość produktu.

Pięć polimeraz DNA proofreading głównych producentów zostało użytych do amplifikacji  ludzkiego DNA  o długości 1.7-2.3 kb. Wszystkie reakcje zostały przeprowadzone zgodnie z zaleceniami producentów. Przy użyciu polimerazy Phusion® Hot Start II High Fidelity DNA Polymerase uzyskano dużą ilość specyficznego produktu, podczas gdy w przypadku pozostałych polimeraz nie uzyskano produktu, uzyskano niewielkie ilości lub też uzyskano produkty niespecyficzne.     

Prezentacja video ustawiania reakcji PCR

Kalkulator Tm

Skład F549S

• Phusion® Hot Start II High Fidelity DNA Polymerase dostarczana jest wraz z:
• 5x Phusion HF Buffer,
• 5x Phusion GC Buffer,
• DMSO
• 50 mM roztwór MgCl₂.
• Zarówno Phusion HF Buffer jak i Phusion GC Buffer zawierają  7.5 mM MgCl₂ w 5x stężeniu.

Skład buforu, w którym zawieszona jest polimeraza
20 mM Tris-HCl (pH 7.4 w 25°C), 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 100 mM KCl, stabilizatory, 200 µg/ml BSA oraz 50% glicerol.