Bezpieczny odczynnik do barwienia żeli agarozowych!
Midori Green DNA Stain jest bezpieczną alternatywą dla karcerogennego bromku etydyny. Jest równie czuły, a procedura barwienia żeli agarozowych odbywa się w ten sam sposób.
Midori Green DNA Stain emituje zielone światło po związaniu z DNA lub RNA. Posiada dwa drugorzędowe szczyty ekscytacji (~300 nm, 400 nm) oraz jeden silny ~ 500 nm. Emisja fluorescencji następuję w obrębie ~540 nm, dzięki temu Midori Green DNA Stain jest kompatybilny z wieloma urządzeniami wizualizującymi.
Rys.1 Żel agarozowy barwiony przy pomocy Midori Green DNA Stain (A) oraz bromku etydyny. (B).
Bezpieczeństwo
Aby ocenić potencjalną genotoksyczność, Midori Green DNA Stain został przetestowany w jąderkach szpiku kostnego myszy:
en.wikipedia.org/wiki/Micronucleus. Wynik był negatywny w przeciwieństwie do bromku etydyny oraz innych barwników. Oprócz tego Midori Green został podany testowi na aberracje chromosomowe:
en.wikipedia.org/wiki/Chromosome_abnormality. Możemy oświadczyć, że Midori Green jest niekancerogenny i na podstawie wyników testu Ames:
en.wikipedia.org/wiki/Ames_test, można stwierdzić, że powoduje znacznie mniej mutacji niż bromek etydyny (rys.2).
Rys. 2. Podsumowanie wyników testu Ames. Stopień mutageniczności Midori Green i bromku etydyny z aktywacją metaboliczną (S9) w oznaczeniu mutageniczności TA98: dawka-odpowiedź. Na podstawie wyników testu Ames można stwierdzić, że Midori Green powoduje znacznie mniej mutacji niż bromek etydyny.
Protokół barwienia:
-
Przygotuj 100 ml roztworu żelu agarozowego (stężenie 0.8-3.0%) i podgrzej do momentu aż roztwór będzie całkowicie klarowny, bez widocznych, pływających kłaczków.
-
Dodaj 2-5 µl of Midori Green DNA Stain do roztworu żelu i delikatnie zamieszaj.
-
Roztwór żelu należy schłodzić do 50-60ºC, a nastepnie wylać na tackę.
-
Kiedy żel się zestali, nałóż próbki i przeprowadź elektroforezy.
-
Uwidocznij prążki w transiluminatorze UV.
Uwagi
Grubość żelu powinna być mniejsza niż 0.5 cm. Powtórne rozpuszczanie żelu zawierającego Midori Green DNA Stain może spowodować niską czułość. Midori Green DNA Stain nie jest kancerogenny, ale może powodować podrażnienia skóry i oczu, dlatego zaleca się stosowanie rękawiczek.
Usuwanie
Midori Green nie jest sklasyfikowany jako substancja niebezpieczna, dlatego może być bezpiecznie usuwany do sieci kanalizacyjnej lub jako zwykły śmieć. Odpady muszą być usuwane zgodnie z obowiązującymi na danym terytorium przepisami środowiskowymi.
Informacje do zamówienia:
|
Nr kat.
|
Wielkość
|
|
|
25 µl
|
|
|
1 ml
|
