- Szybka liza próbek – 10 minut inkubacji w temperaturze pokojowej.
- Wydajne genotypowanie PCR.
- Nakładanie próbek bezpośrednio na żel.
- Uniwersalny – kompatybilny z tkankami myszy, ryby, owadów, ludzkiego włosa oraz śliny.
Zastosowanie:
- genotypowanie,
- detekcja transgenów,
- analiza knockout,
- sekwencjonowanie.
Opis
Fast Tissue-to-PCR Kit jest kompletnym systemem do szybkiej ekstrakcji i amplifikacji genomowego DNA z różnego rodzaju tkanek. Zestaw może być wykorzystany do ekstrakcji i amplifikacji DNA z tkanek myszy, ryby, owadów, ludzkiego włosa oraz śliny. Nie ma potrzeby stosowanie mechanicznego rozrywania tkanek, całonocnego trawienia, ekstrakcji fenolem, precypitacji DNA lub oczyszczania na kolumnach.
Procedura rozpoczyna się 10 minutową inkubacją próbki w temperaturze pokojowej w roztworze do lizy zawierającym proteinazę K. Następnie dodajemy płyn neutralizujący i próbka gotowa jest do przeprowadzenie reakcji PCR w gotowym do użycia roztworze Tissue Green PCR Master Mix (2X).
Mastermix zawiera specjalnie modyfikowaną, wyjątkowo wytrzymała polimerazę DreamTaq™ DNA Polymerase, dNTPs oraz bufor zoptymalizowany do użycia w obecności odczynników do ekstrakcji dostarczonych w zestawie. Oprócz tego mastermix zawiera barwnik wraz z obciążnikiem do nakładania próbek na żel bezpośrednio po reakcji PCR.
Tissue Green PCR Master Mix (2X) umożliwia amplifikację fragmentów o długości do 2 kb natomiast w przypadku multiplex PCR do 4 par starterów. Produkty PCR mogą być użyte bezpośrednio do trawienia oraz sekwencjonowania bez oczyszczania.
Fast Tissue-to-PCR Kit jest kompletnym systemem do szybkiej ekstrakcji i amplifikacji genomowego DNA z różnego rodzaju tkanek. Zestaw może być wykorzystany do ekstrakcji i amplifikacji DNA z tkanek myszy, ryby, owadów, ludzkiego włosa oraz śliny. Nie ma potrzeby stosowanie mechanicznego rozrywania tkanek, całonocnego trawienia, ekstrakcji fenolem, precypitacji DNA lub oczyszczania na kolumnach.
Procedura rozpoczyna się 10 minutową inkubacją próbki w temperaturze pokojowej w roztworze do lizy zawierającym proteinazę K. Następnie dodajemy płyn neutralizujący i próbka gotowa jest do przeprowadzenie reakcji PCR w gotowym do użycia roztworze Tissue Green PCR Master Mix (2X).
Mastermix zawiera specjalnie modyfikowaną, wyjątkowo wytrzymała polimerazę DreamTaq™ DNA Polymerase, dNTPs oraz bufor zoptymalizowany do użycia w obecności odczynników do ekstrakcji dostarczonych w zestawie. Oprócz tego mastermix zawiera barwnik wraz z obciążnikiem do nakładania próbek na żel bezpośrednio po reakcji PCR.
Tissue Green PCR Master Mix (2X) umożliwia amplifikację fragmentów o długości do 2 kb natomiast w przypadku multiplex PCR do 4 par starterów. Produkty PCR mogą być użyte bezpośrednio do trawienia oraz sekwencjonowania bez oczyszczania.
Kontrola jakości
Brak obecności endo-, egzodeoksyrybonukleaz oraz aktywność “nicking” we wszystkich składnikach zestawu została potwierdzona odpowiednimi testami jakości.
Wszystkie elementy zestawu zostały sprawdzone za pomocą testów funkcjonalnych podczas amplifikacji multiplex PCR fragmentów: 114, 214, 388 oraz 515 bp z lizatu 2 mm wycinka ucha myszy.
Brak obecności endo-, egzodeoksyrybonukleaz oraz aktywność “nicking” we wszystkich składnikach zestawu została potwierdzona odpowiednimi testami jakości.
Wszystkie elementy zestawu zostały sprawdzone za pomocą testów funkcjonalnych podczas amplifikacji multiplex PCR fragmentów: 114, 214, 388 oraz 515 bp z lizatu 2 mm wycinka ucha myszy.
Skład zestawu:
- Tissue Lysis Solution
- Proteinase K
- Neutralization Solution T
- Tissue Green PCR Master Mix (2X)
- Water, nuclease-free
- Detailed Protocol
Rys. 1. Kompatybilność z próbkami z różnych materiałów.
DNA genomowe z różnych próbek zostało wykstrahowane i amplifikowane przy użyciu Fast Tissue-to-PCR Kit.
M – GeneRuler™ Express DNA Ladder (#SM1551)
1, 2 – human hair, Uni STS G31656 gene
3, 4 – human saliva, Uni STS G31656 gene
5, 6 – mouse tail, HPRT gene
7, 8 – mouse ear, HPRT gene
9, 10 – mouse finger, HPRT gene
11-12 –zebrafish fin, parvalbumine gene
13-14 – zebrafish fin, α-tubuline gene
Rys 2. Multiplex PCR.
DNA genomowe z ogona, małżowiny usznej oraz palca myszy zostało wykstrahowane i amplifikowane przy użyciu Fast Tissue-to-PCR Kit. Produkty PCR : 114, 214 oraz 388 bp zostały wygenerowane przy użyciu 3 par starterów.
M – GeneRuler™ Express DNA Ladder (#SM1551)
1, 2 – mouse ear clip
3, 4 – mouse tail
5, 6 – mouse finger
Informacje do zamowienia:
Nr kat. K1091 - 200 reakcji
Logowanie
Centrum zamówień
Kontakt