Przygotowywanie białek do elektroforezy SDS-PAGE.
Protein Loading Buffer Pack jest wykorzystywany do przygotowywania próbek białek do elektroforezy SDS-PAGE. Bufor zawiera wszystkie niezbędne składniki potrzebne do rozerwania wysokorzędowych struktur białka. SDS zawarty w buforze wiążąc się do regionów hydrofobowych powoduje rozwijanie się białek, a także nadaje im ładunek ujemny. DTT niszczy struktury drugorzędowe. DTT dostarczany jest w osobnej probówce ze względu na dużą podatność na oksydację podczas cykli rozmrażania-zamrażania. Oprócz tego bufor zawiera glicerol ułatwiający zawieszanie probówek w studzienkach. Błękit bromofenolowy uwidacznia próbki na żelu oraz pozwala na śledzenie postępu elektroforezy.
Skład:
- 5X Loading Buffer: 0.313 M Tris-HCl (pH 6.8 w 25°C), 10% SDS, 0.05% bromophenol blue oraz 50% glicerol.
- 20X Reducing Agent: 2 M DTT.