PageBlue™ Protein Staining Solution
Producent:
Fermentas
Kategoria:
Odczynniki do białek
Numer katalogowy:
R0571
Wielkość opakowania:
1000 ml
Cena brutto:
97.60
W skład PageBlue™ Protein Staining Solution wchodzi Coomassie Briliant Blue G-250, który posiada zdolność do formowania z białkiem koloidalnych cząsteczek. W rezultacie PageBlue™ Protein Staining Solution wykazuje znaczne powinowactwo do białka, a żel poliakryloamidowy pozostaje bezbarwny. Należy także zaznaczyć, że barwnik nie zawiera substancji działających toksycznie na białka (np. metanolu, kwasu octowego itp.).
Cechy charakterystyczne:
-
gotowy do bezpośredniego zastosowania,
-
nietoksyczny,
-
gwarantuje liniowy rozdział w żelu,
-
może być stosowany trzykrotnie,
-
posiada wysoką czułość - 5 ng białka,
-
barwienie z jego użyciem nie jest czasochłonne,
-
żel po jego zastosowaniu nie wymaga wybarwienia,
-
należy przechowywać w temperaturze 4°C.
Sposób użycia
Szybka procedura
1. Po wyciągnięciu żelu z aparatu przepłukujemy go w wodzie destylowanej.
2. Przenosimy na 1 min. do mikrofalówki.
Etapy: 1 i 2 powtarzamy trzykrotnie.
3. Żel zanurzamy w 20ml roztworu PageBlue™ Protein Staining Solution (do całkowitego jego przykrycia).
4. Przenosimy na 30s do mikrofalówki.
5. Żel pozostawiamy w roztworze barwnika na 20 min.
6. Przepłukujemy żel jałową wodą.
Uniwersalna procedura:
1. Po wyciągnięciu żelu z aparatu przepłukujemy go w wodzie destylowanej.
2. Przenosimy na 1 min. do mikrofalówki.
3. Żel zanurzamy w 20ml roztworu PageBlue™ Protein Staining Solution (do całkowitego jego przykrycia).
4. Przenosimy na 30s do mikrofalówki.
5. Żel pozostawiamy w roztworze barwnika na 60 min lub na całą noc.
6. Przepłukujemy żel jałową wodą.
1. Po wyciągnięciu żelu z aparatu przepłukujemy go w wodzie destylowanej.
2. Przenosimy na 1 min. do mikrofalówki.
3. Żel zanurzamy w 20ml roztworu PageBlue™ Protein Staining Solution (do całkowitego jego przykrycia).
4. Przenosimy na 30s do mikrofalówki.
5. Żel pozostawiamy w roztworze barwnika na 60 min lub na całą noc.
6. Przepłukujemy żel jałową wodą.
Uwagi:
-
W przypadku dużego żelu należy zastosować większą objętość roztworu barwnika.
-
Etap pierwszy (przepłukiwanie wodą po wyciągnięciu żelu z aparatu) można ominąć w przypadku rozdziału elektroforetycznego w warunkach natywnych. Etap ten ma bowiem na celu usunięcie resztek roztworu SDS (substancja ta nie jest stosowana w warunkach natywnych).
-
Większą czułość barwienia można uzyskać poprzez 15-minutowe płukanie białek w roztworze 12% kwasu trójchlorooctowego lub 25% izopropanolu czy 10% kwasu octowego. Płukanie pozwala zapobiec dyfuzji małych białek z żelu, a jednocześnie pomaga usunąć resztki roztworu SDS.
Przykładowy wynik barwienia białek rozdzielanych w 12% żelu poliakryloamidowym.
Figure 1. Sensitivity and linear dynamic range of PageBlue™ Protein Staining Solution.
A – beta-galactosidase
B – bovine serum albumin
Electrophoresis conditions: 12% Tris-glycine SDS-PAGE, 0.75 mm gel, well width 3 mm.