W nowej ofercie firmy Fermentas znalazł się nowy barwnik - PageBlue™ Protein Staining Solution przeznaczony do rozdziału elektroforetycznego białek w żelach poliakryloamidowych. Niepodważalną zaletą barwnika jest jego wysoka czułość, pozwala na wykrycie nawet 5ng białka. W skład PageBlue™ Protein Staining Solution wchodzi Coomassie Briliant Blue G-250, który posiada zdolność do formowania z białkiem koloidalnych cząsteczek. W rezultacie PageBlue™ Protein Staining Solution wykazuje znaczne powinowactwo do białka, a żel poliakryloamidowy pozostaje bezbarwny. Należy także zaznaczyć, że barwnik nie zawiera substancji działających toksycznie na białka (np. metanolu, kwasu octowego itp.).

Cechy charakterystyczne roztworu barwnika:
• gotowy do bezpośredniego zastosowania,
• nietoksyczny,
• gwarantuje liniowy rozdział w żelu,
• może być stosowany trzykrotnie,
• posiada wysoką czułość,
• barwienie z jego użyciem nie jest czasochłonne,
• żel po jego zastosowaniu nie wymaga wybarwienia,
• należy przechowywać w temperaturze 4°C.

Sposób użycia

Szybka procedura
1. Po wyciągnięciu żelu z aparatu przepłukujemy go w wodzie destylowanej.
2. Przenosimy na 1min. do mikrofalówki.
   Etapy: 1 i 2 powtarzamy trzykrotnie
3. Żel zanurzamy w 20ml roztworu PageBlue™ Protein Staining Solution (do całkowitego jego przykrycia).
4. Przenosimy na 30s do mikrofalówki.
5. Żel pozostawiamy w roztworze barwnika na 20 min.
6. Przepłukujemy żel jałową wodą.

Uniwersalna procedura
1. Po wyciągnięciu żelu z aparatu przepłukujemy go w wodzie destylowanej.
2. Przenosimy na 1min. do mikrofalówki.
3. Żel zanurzamy w 20ml roztworu PageBlue™ Protein Staining Solution (do całkowitego jego przykrycia).
4. Przenosimy na 30s do mikrofalówki.
5. Żel pozostawiamy w roztworze barwnika na 60 min lub na całą noc.
6. Przepłukujemy żel jałową wodą.

Uwagi:
• W przypadku dużego żelu należy zastosować większą objętość roztworu barwnika.
• Etap pierwszy (przepłukiwanie wodą po wyciągnięciu żelu z aparatu) można ominąć w przypadku rozdziału elektroforetycznego w warunkach natywnych. Etap ten ma bowiem na celu usunięcie resztek roztworu SDS (substancja ta nie jest stosowana w warunkach natywnych).
• Większą czułość barwienia można uzyskać poprzez 15-minutowe płukanie białek w roztworze 12% kwasu trójchlorooctowego lub 25% izopropanolu czy 10% kwasu octowego. Płukanie pozwala zapobiec dyfuzji małych białek z żelu, a jednocześnie pomaga usunąć resztki roztworu SDS.

Przykładowy wynik barwienia białek rozdzielanych w 12% żelu poliakryloamidowym przedstawia poniższe zdjęcie.